潔淨室微生物汙染的來源舉例分析

新版GMP要求，需對環境及不同階段產(chan) 品監控的微生物進行鑒定，並建立汙染菌種庫，便於(yu) 對日常監測中出現異常菌株與(yu) 菌種庫進行比對，查找其來源，以便采取有效措施。

通常，潔淨區裏典型的汙染菌主要來源如下：

• 人體(ti) 表麵：革蘭(lan) 氏陽性球菌為(wei) 主

• 其次是環境：革蘭(lan) 氏陽性杆菌為(wei) 主

• 和各種水源：革蘭(lan) 氏陰性杆菌為(wei) 主的微生物

數據表明，在所有級別的潔淨區中，檢出菌類別的比例大概如下：

檢出菌的鑒定在無菌保障工藝中非常重要，可以反映出許多細節。

舉(ju) 例如下：

1、當潔淨區檢出菌的類別以革蘭(lan) 氏陽性球菌屬為(wei) 主的情況下，大致符合上述比例，表明潔淨室繼續在正常範圍內(nei) 起作用，不必過分擔憂。

2、潔淨區檢出菌中，皮膚相關(guan) 的微生物最常見，微球菌屬和葡萄球菌屬占50%以上，第二個(ge) 最常見的屬是芽孢杆菌屬約占13%。

雖然革蘭(lan) 氏陽性微生物在潔淨室中普遍存在，但其實對於(yu) 葡萄球菌和微球菌屬，多是人類身上固有的微生物。應注意調查此部分微生物的被采集者，加強培訓，提高人員的無菌意識，規範人員更衣程序和潔淨區行為(wei) 。

3、微球菌屬中藤黃微球菌檢出率最高，它是藥物環境監測中最常見的微生物之一。通常與(yu) 人體(ti) 皮膚有關(guan) ，尤其是與(yu) 頭部，手臂和腿部。無菌技術的缺陷以及潔淨室管理不善是藤黃微球菌汙染的常見原因。

4、芽孢杆菌屬中蠟狀芽孢杆菌檢出率最高，蠟狀芽孢杆菌的孢子通常被確定為(wei) 最難消毒和根除的。根據檢出地點，應引起足夠重視。

5、丙酸杆菌和棒狀菌毋庸置疑來自於(yu) 人體(ti) 。

但當某短時間在高級別潔淨室中頻繁檢出如人表皮葡萄球菌屬、丙酸杆菌屬等來自於(yu) 人體(ti) 的微生物，應注意在生產(chan) 過程中規範人員更衣程序和潔淨區行為(wei) 。或者評估所穿潔淨服的過濾能力，潔淨服由於(yu) 反複滅菌使用，並無法保證所有重複使用的潔淨服都具有相同的過濾性能。

6、革蘭(lan) 氏陽性杆菌出現在物體(ti) 表麵的頻率更高。

與(yu) A、B級潔淨區相比，C、D級潔淨室中，革蘭(lan) 氏陽性杆菌的數量相對較高，這符合正常現象，因為(wei) 物品進入低級潔淨室的清潔消毒程序往往較不嚴(yan) 格。

7、潔淨區中革蘭(lan) 氏陰性杆菌的比例指示水源汙染程度。

在D級潔淨室中， 革蘭(lan) 氏陰性杆菌占分離物的比例要大得多。這也反映了在這些地方水槽（水源）較多。

若在A、B潔淨室中革蘭(lan) 氏陰性杆菌的比例較高，應引起重視。可能與(yu) 潔淨室濕度設置過高有關(guan) ，或部分水漬未及時清理擦幹，也存在製藥用水過濾除菌不夠徹底的可能。企業(ye) 可以實行無水化管理。

8、絕大多數來自潔淨區的細菌是中溫好氧或兼性需氧菌。但在使用特殊氣體(ti) 與(yu) 冷凍幹燥機相關(guan) 聯的情況下，部分細菌可在厭氧條件下生長並被發現。

如痤瘡丙酸杆菌可能在凍幹製品中被發現，因為(wei) 本菌為(wei) 厭氧或兼性厭氧，是無菌灌封中令人頭痛的一種微生物，根據經驗，該微生物直到在培養(yang) 基中培養(yang) 12 天後才能生長到肉眼可以觀察的濃度。

9、芽孢汙染是製藥企業(ye) 車間較為(wei) 嚴(yan) 重的汙染之一，應注意每月交替更換消毒劑，使用殺孢子劑定期殺滅芽孢。

10、潔淨區中真菌的檢出率也很低。如果真菌的發生率較高，鑒於(yu) 真菌的生長特性，反映了一些潔淨室的濕度較高或者通風不良。

特別每年梅雨季節時，空氣濕度大，真菌可能快速生長繁殖，如果物品傳(chuan) 遞、脫包消毒程序不夠完善，未經處理的外氣流流入，以及物品和人員，都有可能攜帶微生物進入潔淨區。

潔淨室一旦有大量真菌汙染，采用紫外消毒或消毒液不易殺滅，以致無菌保障水平得到嚴(yan) 重破壞，應當重視潔淨區真菌汙染。

最後，潔淨區檢出菌所反應出的信息遠不止上述內(nei) 容，我們(men) 目前還隻是管中窺豹。無菌保障工藝中關(guan) 鍵的方麵，是將汙染數據與(yu) 汙染控製措施相關(guan) 聯。重點分析微生物趨勢並采取相應措施。

通過檢出菌鑒別盡可能找到汙染源，消除或減少汙染源頭的風險比依靠空氣過濾或清潔程序更有意義(yi) 。